problème d'hybridation in situ

bonjour a tous et a toute, je fait des hybridation in situ sur coupe d'éponges que je révèle au nbt/bcip, les morceau d'éponges sont fixé a la paraformaldéhyde et sont inclus en paraffine, les coupes font 10 µm d'épaisseur. et j'ai un problème: avec mon témoin actine qui devrait être coloré de façon homogène j’obtiens ceci: Pièce jointe 232848



on a tout essayer, changer la PAF, changé le temps des bains pour inclure, mettre ou enlevé de la Protéinase K.



si quelqu'un a une idée ou as déjà eu ce problème j'aurais bien besoin d'aide :S:

via Forum FS Generation http://forums.futura-sciences.com/biologie/621965-probleme-dhybridation-in-situ.html